山亭未 发表于 2018-10-12 14:53:06

想做一个探针,但不知道该用什么样的试剂盒好,而且探...

大神们好,我想做一个根瘤菌的nod基因的探针,目前找了一段1000bp的序列,保守型比较高,然后设计了一对引物可以扩增出这段片段来。接下来不知道是在这段nod基因上怎么进行标记?还是在引物上加上一标记然后直接扩增?我看了很多文献,越来越糊涂,有的文献在其他基因上直接标记了一段单链DNA:5'-DIG-ATCGATCGATCGATCG-3'-这样一段。这是一段引物吗?有的文献有加正反引物,然后加标记,加DNA模板然后在PCR里扩增,还有的直接说用生物素试剂盒进行标记。试剂盒这么多,我有点搞不清用哪种试剂盒了,希望能有人给我一个推荐。然后给我解答一下,谢谢

踏骨征王 发表于 2018-10-12 14:53:16

你想用设计一个探针,那不就是taqman探针法就可以了啊
你的一对引物,加一条探针序列(可以理解长一个F引物或者R引物),然后进行荧光定量pcr就可以了
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