半胱氨酸二硫化物检测和结合技术对于理解蛋白质功能和开发二硫化物衍生治疗药物至关重要。目前，二硫化物改性需要在功能化之前进行还原裂解，这对二硫化物与游离硫醇的区分提出了挑战。在此，我们描述了氧化还原辅助的二硫化物直接共轭（Redox-assisted Disulfide Direct Conjugation，RDDC）作为一种新方法，可以实现二硫化物的再桥化，而不与游离硫醇发生交叉反应。

图1. 二硫化物生物结合策略及 RDDC 的设计。A)传统的还原共轭方法不能区分二硫化物和游离硫醇。B)为了实现选择性二硫键结合，游离硫醇在二硫键还原和结合之前被屏蔽。C)氧化还原辅助直接二硫键(RDDC)允许选择性二硫键一步结合。D) RDDC 的机械原理。二硫化物氧化膦1会激活其醛基。捕获2释放的硫醇将产生3，通过 oxonion4重排形成二硫缩醛5。

难以避免的是 在醛和lys的缩合形成可逆性的亚胺结构14’。但是在DMSO做溶剂，则没有观测到14’。

总之，RDDC 是一种可以直接修饰二硫键的新型生物接合方法。与以前的二硫键连接方法相比，它不需要在接合之前对二硫键进行还原性切割。RDDC 通过氧化还原辅助的二硫缩醛形成选择性地将一碳单元插入到二硫键中。它补充了目前使用烷基化或缀合物添加来建立具有二碳或三碳插入的稳定桥的肽二硫键吻合方法。RDDC 不与半胱氨酸发生交叉反应，仅与赖氨酸发生最小程度的可逆反应。它也可以用于普通的水缓冲液进行生物学研究，而不需要有机共溶剂。这些特征使 RDDC 成为研究二硫化物 PTM 的有效方法。然而，在稀水条件下11b 肽的转化率和选择性仍然不理想。由于从未反应的13中分离14具有挑战性，因此需要进一步改进以克服这一局限性，使该方法对于肽的合成和 ADC 的合成具有实际的应用价值。正在努力将 RDDC 应用于生物系统中二硫化物的基于活性的蛋白质分析。

半胱氨酸二硫化物检测和结合技术对于理解蛋白质功能和开发二硫化物衍生治疗药物至关重要。目前，二硫化物改性需要在功能化之前进行还原裂解，这对二硫化物与游离硫醇的区分提出了挑战。在此，我们描述了氧化还原辅助的二硫化物直接共轭（Redox-assisted Disulfide Direct Conjugation，RDDC）作为一种新方法，可以实现二硫化物的再桥化，而不与游离硫醇发生交叉反应。

图1. 二硫化物生物结合策略及 RDDC 的设计。A)传统的还原共轭方法不能区分二硫化物和游离硫醇。B)为了实现选择性二硫键结合，游离硫醇在二硫键还原和结合之前被屏蔽。C)氧化还原辅助直接二硫键(RDDC)允许选择性二硫键一步结合。D) RDDC 的机械原理。二硫化物氧化膦1会激活其醛基。捕获2释放的硫醇将产生3，通过 oxonion4重排形成二硫缩醛5。

难以避免的是 在醛和lys的缩合形成可逆性的亚胺结构14’。但是在DMSO做溶剂，则没有观测到14’。

总之，RDDC 是一种可以直接修饰二硫键的新型生物接合方法。与以前的二硫键连接方法相比，它不需要在接合之前对二硫键进行还原性切割。RDDC 通过氧化还原辅助的二硫缩醛形成选择性地将一碳单元插入到二硫键中。它补充了目前使用烷基化或缀合物添加来建立具有二碳或三碳插入的稳定桥的肽二硫键吻合方法。RDDC 不与半胱氨酸发生交叉反应，仅与赖氨酸发生最小程度的可逆反应。它也可以用于普通的水缓冲液进行生物学研究，而不需要有机共溶剂。这些特征使 RDDC 成为研究二硫化物 PTM 的有效方法。然而，在稀水条件下11b 肽的转化率和选择性仍然不理想。由于从未反应的13中分离14具有挑战性，因此需要进一步改进以克服这一局限性，使该方法对于肽的合成和 ADC 的合成具有实际的应用价值。正在努力将 RDDC 应用于生物系统中二硫化物的基于活性的蛋白质分析。